1.取 100ul感受态细胞于冰浴上融化。

2. 加入 1ul纯质粒或连接产物，轻轻吹打混匀，冰浴 30 min。

3. 将菌液放入 42℃水浴中热激 90 秒，立即放入冰浴中 2 min。

4. 加入 0.9ml SOC，于 37℃恒温摇床上 200rpm×1hr 温育。

5. 将菌液 4000rpm/min 离心 3min，留 200ul上清将菌体打散，均匀涂布于含适当

抗生素的琼脂平板表面，平板于 37℃倒置培养过夜。

i.

注：新倒的平板可于 37℃培养箱中预先放置数小时至过夜干燥。

ii.

当转化的是 TA 克隆连接产物时可在菌液中加入 8ul 1M IPTG 和 40ul20mg/ml X-gal 以进行蓝白斑筛选。